Как правило, сперму вводят в канал шейки матки (цервикальное осеменение). В некоторых случаях сперму выдавливают на шейку матки (парацервикальное осеменение). Доставку коров и телок на пункт искусственного осеменения, фиксацию их в станке и осеменение необходимо проводить без приемов, вызывающих боль. Нельзя использовать нестерильные, холодные или горячие инструменты для введения в половые органы коров и телок.
Перед искусственным осеменением каждой коровы обязательно проводят туалет её наружных половых органов: их тщательно обмывают раствором фурацилина (1:5000) и насухо вытирают (тампонируют) стерильной салфеткой, ватой или полотенцем. После туалета половых органов животного техник по искусственному осеменению обрабатывает руки: моет в теплой воде с мылом, вытирает стерильным полотенцем и обеззараживает 96-градусным этиловым спиртом.
При проведении искусственного осеменения коров и телок пользуются тремя способами.
Визоцервикальный способ осеменения (осеменение коров и телок шприцем-катетером через влагалищное зеркало). Инструменты приготавливают в лаборатории пункта. В три банки (№ 1, 3 и 4) наливают свежеприготовленный стерильный 1%-ный раствор бикарбоната натрия или 2,9%-ный раствор лимоннокислого натрия, а в 4-ю банку (№ 2) — 70-градусный спирт. Раствор в банках № 3 и № 4 должен быть теплым (38-40°С), чтобы шприц перед наполнением спермой нагрелся.
Кроме того, в тампонницу помещают ватные тампоны, пропитанные 96-градусным спиртом, и стерильные салфетки. Для отработанных растворов необходимо иметь чашку из толстостенного стекла. Перед началом работы шприц-катетер, заранее простерилизованный кипячением или сохраняемый в спирте, отмывают раствором из банок № 3 и № 4 (по 3-4 раза каждым). Влагалищное зеркало перед использованием стерилизуют кипячением, сухим жаром либо обеззараживают над пламенем горящего тампона, пропитанного 96-градусным спиртом. Осветитель обрабатывают путем тщательного протирания спиртовым тампоном.
Обхватив канюлю шприца стерильной марлевой салфеткой, движением поршня удаляют остатки раствора и набирают сперму для осеменения. Набрав сперму, шприц держат вертикально катетером вверх и движением поршня вниз собирают её в цилиндр шприца, затем движением поршня вверх вытесняют из цилиндра и катетера пузырьки воздуха до появления капли на конце катетера.
Влагалищное зеркало с осветителем, увлажненное теплым (38-40°С) 0,9%-ным раствором хлористого натрия или 1%-ным раствором двууглекислой соды, вводят, раскрыв половые губы, во влагалище самки, держа зеркало ручками в сторону, до упора. Затем зеркало поворачивают ручками вниз и, осторожно раскрыв его ветви и отыскав шейку матки, вводят в канал шейки матки канюлю шприца-катетера на глубину 4-6 см. Медленно нажимая на поршень шприца, вводят сперму в дозе 1 мл. После этого шприц-катетер, а затем и зеркало извлекают, предварительно осторожно повернув последнее в исходное положение (ручками в сторону), с неполностью сомкнутыми ветвями, чтобы не ущемить слизистую оболочку влагалища.
Телок осеменяют так же, как и коров, но пользуются зеркалом меньшего размера. Если катетер ввести в шейку матки невозможно, сперму вводят в глубокую часть влагалища и опрыскивают ею шейку матки в количестве 2-3 мл. При осеменении нескольких коров спермой одного быка наружную поверхность катетера после осеменения каждой коровы обязательно дезинфицируют спиртовым тампоном, стараясь, чтобы спирт при этом не попал в канал шприца-катетера. При осеменении коров одним шприцем-катетером спермой разных быков сначала обрабатывают наружную поверхность шприца, как указано выше, а затем отмывают от спермы внутреннюю его поверхность.
Цервикальное осеменение с ректальной фиксацией шейки матки. Корове или телке сперму вводят в шейку матки с помощью стерильных одноразовых пластмассовых, стеклянных или металлических инструментов без применения влагалищного зеркала, фиксируя шейку матки рукой через прямую кишку.
Для искусственного осеменения коров и телок цервикальным способом с ректальной фиксацией шейки матки в набор инструментов входят: стерильная полистироловая или стеклянная пипетка длиной 450 мм с наружным диаметром 5 мм и внутренним — 1,8-2 мм; стерильный пластмассовый двухграммовый шприц с соединительной муфтой (полиэтиленовой, резиновой). Для выталкивания спермы можно использовать также полиэтиленовую ампулу, резиновый или пластмассовый баллончик, полиэтиленовые перчатки длиной 850 мм с толщиной пленки 30-40 микрометров. Можно также пользоваться акушерской резиновой перчаткой.
При осеменении спермой, замороженной в соломинках (пайеттах), применяют инструмент (пистолет), состоящий из ручки, трубки, поршня и фиксатора, а также специального полихлорвинилового защитного чехла для трубки пистолета, который используется одноразово. Сначала один из углов пакета, в котором герметизированы стерильные пипетки, протирают тампоном, смоченным 96-градусным спиртом. Затем угол пакета прорывают пипеткой изнутри либо надрезают стерильными ножницами. Из пакета выталкивают часть пипетки и на её конец надевают баллончик, ампулу или шприц с муфтой. После этого пипетку вынимают полностью, а открытый угол пакета оплавляют пламенем спички либо, завернув угол, скрепляют скрепкой, резиновым кольцом и др. Затем при помощи шприца (баллончика, ампулы) во внутренний канал пипетки набирают сперму (1-1,2 мл).
После того как техник наденет на одну руку полиэтиленовую перчатку, он увлажняет её теплой мыльной водой. Этой рукой он раскрывает срамные губы животного и, не касаясь их пипеткой, вводит пипетку другой рукой снизу вверх до верхнего свода влагалища, а затем горизонтально, до упора, в область шейки матки. Придерживая пипетку горизонтально, руку в перчатке вводит в прямую кишку и при необходимости освобождает её от фекальных масс. Если конец пипетки попал в складку влагалища, его освобождают и придвигают к наружной части шейки матки. Затем необходимо исследовать состояние матки и яичников. При этом производится легкий массаж матки.
Убедившись в целесообразности проведения осеменения животного, техник фиксирует шейку матки кистью руки и под контролем пальцев вводит пипетку в цервикальный канал. Введя пипетку в цервикальный канал, он кистью руки захватывает шейку матки и, вращая её в разные стороны, продвигает пипетку в переднюю часть шейки матки. Сперму выдавливает, нажимая на баллончик (ампулу или поршень шприца). Затем достает из термоса ампулу со спермой и протирает её тампоном, пропитанным 96-градусным спиртом. Стерильными ножницами срезает колпачок ампулы и соединяет её с катетером, не вынимая последний из упаковочного полиэтиленового пакетика. Положив инструменты на стерильную подставку, техник надевает стерильную полиэтиленовую перчатку, смачивает её 0,9%-ным раствором хлористого натрия или 1%-ным раствором двууглекислой соды, осторожно вводит руку во влагалище коровы и определяет степень раскрытия шейки матки. Затем пальцами в течение 1 минуты производит массаж влагалищной части шейки матки.
После осеменения полистироловую пипетку и полиэтиленовую перчатку уничтожают. Полиэтиленовые шприцы, стеклянные пипетки, резиновые перчатки и баллончики после соответствующей обработки и стерилизации можно использовать многократно.
Маноцервикальный способ осеменения. Маноцервикальный способ осеменения коров заключается во введении инструмента в половые пути непосредственно рукой, защищенной стерильной перчаткой.
Для осеменения телок этот метод не используется, так как при введении руки во влагалище его можно травмировать.
При этом способе осеменения сперму в полиэтиленовой ампуле, соединенной со стерильным полиэтиленовым катетером, вводят на достаточную глубину в канал шейки матки.
Для осеменения коров маноцервикальным способом в набор инструментов входят: стерильная полиэтиленовая перчатка; стерильная ампула из нетоксичного для спермы полиэтилена, имеющая форму усеченного конуса длиной 48 мм; стерильный катетер из нетоксичного для спермы полиэтилена.
Вызвав сокращение матки, техник, не вынимая руки из влагалища, другой рукой подает подготовленный для осеменения инструмент. Массируя шейку матки кончиками пальцев, подталкивает ампулу ладонью до тех пор, пока катетер полностью (на глубину 6-7 см) не войдет в канал шейки матки. После этого приподнимает ампулу вверх на 2-3 см (угол наклона 15-20°) и выдавливает из нее сперму большим и указательным пальцами в момент расслабления шейки, т. е. всасывающего действия матки. Не разжимая ампулы, техник извлекает катетер из канала шейки матки и, положив инструмент на дно влагалища, дополнительно массирует шейку матки. Вынимать руку с катетером нужно осторожно. Инструменты и перчатку после осеменения каждой коровы уничтожают.
Для осеменения коров спермой в облицованных гранулах их извлекают из жидкого азота и помещают в воду с температурой 38-40°С на 5-10 секунд для оттаивания до появления тонкого стерженька льда. Оценку активности спермиев проводят при температуре 38-40°С выборочно каждой новой партии спермы. Оттаянные гранулы протирают стерильной марлевой салфеткой и обеззараживают спиртовым тампоном. Затем гранулу со спермой вкладывают в корпус специального стерильного полиэтиленового прибора одноразового пользования и толкателем продвигают её до переднего упора.
Осеменение коров производят маноцервикальным способом. Прибор вводят в шейку матки и, большим пальцем, нажимая на толкатель, прорывают гранулу и впрыскивают сперму в канал шейки. При осеменении коров и телок ректо- и визоцервикальным способами спермой в облицованных гранулах применяют специальный удлинитель, на который навинчивают стерильный полиэтиленовый прибор одноразового пользования.
После осеменения коров и телок необходимо выдерживать на привязи или в стойле (в летнее время — под навесом) отдельно от стада до прекращения признаков охоты. Коров, не пришедших в охоту в течение 30-45 дней после отела, а также коров, многократно (два раза и более) осемененных, но вновь приходящих в охоту, необходимо обязательно показать ветеринарным специалистам для устранения причин, препятствующих оплодотворению.
Осеменение коров и телок при самопроизвольном введении спермы во время отрицательного давления в матке. В данном случае производят все манипуляции, как при ректоцервикальном осеменении коров. Однако после введения пипетки в цервикальный канал удаляют руку из прямой кишки, снимают перчатку и массируют область спины коровы, чтобы возбудить центры маточных сокращений. После успокоения животного и согревания спермы в пипетке от последней отделяют шприц, оставляя наружный конец пипетки открытым. Наблюдают за столбиком спермы, который слегка колеблется, и вследствие отрицательного внутриматочного давления сперма плавно поступает в матку.